水中氨氮的測定—納氏試劑分光光度法

一、實驗試劑
10%硫酸鋅溶液，25%氫氧化鈉溶液，納氏試劑，酒石酸鉀鈉溶液，銨標準使用溶液 0.010mg/ml

二、實驗儀器
UNICO分光光度計，50ml比色管8支，漏斗，實驗室常用儀器

三、實驗步驟
1. 試劑配制
    10%硫酸鋅溶液：稱取10g硫酸鋅溶于水，稀釋100ml，貯于玻璃試劑瓶中
    25%氫氧化鈉溶液：稱取25g氫氧化鈉溶于水，稀釋至100ml，貯于聚乙烯瓶中
    納氏試劑：稱取16g氫氧化鈉，溶于50mL水中，充分冷卻至室溫。另稱取7g碘化鉀和10g碘化汞（HgI2）溶于水，然后將親氧化鈉溶液在攪拌下徐徐注入此溶液中。用水稀釋至100mL，貯于聚乙烯瓶中。
    酒石酸鉀鈉溶液：稱取50g酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6·4H2O）溶于100mL水中，加熱煮沸以除去氨，放冷，定容至100mL
    銨標準貯備溶液：稱取0.3819g經100℃干燥過的氯化銨（NH4Cl）溶于水中，移入100mL容量瓶中，稀釋至標線。此溶液每毫升含1.00mg氨氮。
 銨標準使用溶液：移取2.50mL銨標準貯備液于250mL容量瓶中，用水稀釋至標線。此溶液每毫升含0.010mg氨氮。
2. 氨氮的測定
2.1標準曲線的繪制
    用氯化銨配制的標準使用液，每毫升溶液含有氨氮0.01mg，分別吸取0，0.5、1.0、3.0、5.0、7.0、10.0ml溶液于50ml比色管中，加水至標線，加1.0ml酒石酸鉀鈉溶液，混勻。加1.5ml納氏試劑，混勻。防止10min，在波長420nm，用光程偉20nm的比色皿，以水為參比，測量吸光度。減去空白吸光度，得到校正吸光度，繪制以氨氮含量（mg）對校正吸光度的校準曲線。
2.2預處理水樣
 取水樣100ml于燒杯中，加入10%的硫酸鋅溶液1ml，滴加25%的氫氧化鈉溶液0.1-0.2ml（大約2-3滴），調節pH值至10.5左右。然后用中速定量濾紙過濾，棄去初濾液20ml左右。
 
2.3水樣的測定
    取濾液5ml（保證其中氨氮含量不超過0.1mg）于50ml比色管中，用蒸餾水稀釋至刻度線，加1.0ml酒石酸鉀鈉溶液，1.5ml納氏試劑，搖勻，靜置顯色10min，在721分光光度計上，于420nm波長處，以水為參比，用2cm比色皿測定吸光度。
2.4空白實驗
    用100ml蒸餾水代替水樣，同步進行實驗，即從預處理開始，直到測定吸光度。