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金黃色葡萄球菌檢測(cè)板
詳細(xì)說(shuō)明
1、原理及適用范圍
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus簡(jiǎn)稱金葡菌)是人類最常見(jiàn)的致病菌之一,其侵襲力很強(qiáng),能產(chǎn)生多種致病物質(zhì)如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛(wèi)生問(wèn)題,我國(guó)每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報(bào)道。金黃色葡萄球菌檢測(cè)板含有選擇性培養(yǎng)基和專一性的酶顯色劑,運(yùn)用微生物測(cè)試片專有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15-24 h就可確定出病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序。本品對(duì)于提高衛(wèi)生行政監(jiān)督部門(mén)對(duì)食源性疾病的監(jiān)測(cè)能力和預(yù)警能力,以及應(yīng)對(duì)細(xì)菌性食物中毒突發(fā)公共衛(wèi)生事件中的反應(yīng)能力具有重要的作用,同時(shí)也可在食品生產(chǎn)企業(yè)使用。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)》(GB 4789.10)。
2、操作方法 2.1 樣品處理:取樣品 25 mL(g)放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)袋內(nèi),制成1:10的樣品勻液。根據(jù)樣品污染程度及檢驗(yàn)需要,可進(jìn)一步制成10倍遞增的樣品稀釋液,選擇2~3 個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)來(lái)進(jìn)行接種。 2.2 接種:將金黃色葡萄球菌檢測(cè)板上層膜不干膠標(biāo)簽部分揭開(kāi),用無(wú)菌吸管吸取1 mL樣品勻液均勻地滴加到紙片上,迅速貼好上層膜并水平晃動(dòng)檢測(cè)板,讓樣品勻液均勻吸附在濾紙上,靜置10 s左右,待樣品勻液完全被吸附在濾紙上。每個(gè)梯度接種兩片作為重復(fù)。 2.3 培 養(yǎng):將檢測(cè)板疊在一起,倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),36℃±1℃,培養(yǎng)15~24 h。
3、結(jié)果判讀 紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌;呈藍(lán)色的菌落為其他雜菌。選擇菌落數(shù)適中(20~200CFU)的檢測(cè)板進(jìn)行計(jì)數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升(克)樣品中所含的金黃色葡萄球菌數(shù)目。
4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式 4.1 若只有一個(gè)稀釋度檢測(cè)板上的菌點(diǎn)數(shù)目在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi),計(jì)算兩個(gè)檢測(cè)板菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),作為每毫升(克)樣品中所含的金黃色葡萄球菌結(jié)果。 4.2 若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的檢測(cè)板菌落數(shù)目在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí),按式(1)計(jì)算: ∑C N= ———————— •••••••••••••••••••(1) (n1+0.1n2)d 式中: N——樣品中金黃色葡萄球菌數(shù)目; ∑C——檢測(cè)板上(含適宜范圍菌落數(shù)的檢測(cè)板)菌落數(shù)之和; n1——第一稀釋度(低稀釋倍數(shù))檢測(cè)板數(shù); n2——第二稀釋度(高稀釋倍數(shù))檢測(cè)板數(shù); d——稀釋因子(第一稀釋度)。 4.3 若所有的稀釋度菌落數(shù)目均大于200 CFU,則對(duì)稀釋度最高的測(cè)試片進(jìn)行計(jì)數(shù),其他檢測(cè)板可記錄為多不可計(jì),結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。 4.4 若所有的稀釋度菌落數(shù)目均小于20 CFU,則按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。 4.5 若所有的稀釋度均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計(jì)算。 4.6 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)目均不在20-200 CFU之間,其中一部分小于20 CFU或者大于300 CFU,則以最接近20 CFU或200 CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。
5、結(jié)果報(bào)告 固體樣品以CFU/g為單位報(bào)告,液體樣品以CFU/mL為單位報(bào)告。
6、附加說(shuō)明 注意使用過(guò)的檢測(cè)板上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。 更多>本企業(yè)其它產(chǎn)品
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