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應(yīng)用
分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸、蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。我們實(shí)驗(yàn)室多參數(shù)PH,溶解氧水質(zhì)檢測儀主要是用來測物質(zhì)的光度以求得物質(zhì)的濃度或者酶活。
基本原理
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團(tuán)的信息，可以用標(biāo)準(zhǔn)光譜圖再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。
朗伯-比爾定律：當(dāng)一束平行單色光通過含有吸光物質(zhì)的稀溶液時(shí)，溶液的吸光度與吸光物質(zhì)濃度、液層厚度乘積成正比，即
A=kcl
式中比例常數(shù)k與吸光物質(zhì)的本性，入射光波長及溫度等因素有關(guān)。c為吸光物質(zhì)濃度，l為透光液層厚度。
組成
  各種型號(hào)的紫外－可見分光光度計(jì)，就其基本結(jié)構(gòu)來說，都是由五個(gè)基本部分組成，即光源、單色器、吸收池、檢測器及信號(hào)指示系統(tǒng)。
1.光源
在紫外可見分光光度計(jì)中，常用的光源有兩類：熱輻射光源和氣體放電光源。熱輻射光源用于可見光區(qū)，如鎢燈和鹵鎢燈；氣體放電光源用于紫外光區(qū)，如氫燈和氘燈。
2．單色器
單色器的主要組成：入射狹縫、出射狹縫、色散元件和準(zhǔn)直鏡等部分。
單色器質(zhì)量的優(yōu)劣，主要決定于色散元件的質(zhì)量。色散元件常用棱鏡和光柵。由吸光度隨時(shí)間的變化計(jì)算酶的活性。•