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紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的用途是什么

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核心提示:用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光(400~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱為可見(jiàn)分光光度計(jì)。截止閥可在600nm測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。(
用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光(400~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱為可見(jiàn)分光光度計(jì)。截止閥
可在600nm測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。
(2)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)
紫外可見(jiàn)光譜儀用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。可以測(cè)定核酸和蛋白的濃度,渦街流量計(jì)也可以測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。
紫外分光光度計(jì)又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區(qū)別。
單光束:適于在給定波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度或透光度,一般不能作全波段光譜掃描,要求光源和檢測(cè)器具有很高的穩(wěn)定性。
雙光束:自動(dòng)記錄,快速全波段掃描。可消除光源不穩(wěn)定、檢測(cè)器靈敏度變化等因素的影響,特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜,價(jià)格較高。
假雙光束也就是比例雙光束,它的原理是由同一單色器發(fā)出的光被分成兩束,一束直接到達(dá)檢測(cè)器,另一束通過(guò)樣品后到達(dá)另一個(gè)檢測(cè)器。電熱帶這種儀器的優(yōu)點(diǎn)是可以監(jiān)測(cè)光源變化帶來(lái)的誤差,但是并不能消除參比造成的影響。
(3)紅外分光光度計(jì)
一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機(jī)化合物最常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。
紅外光譜法的特點(diǎn)是:快速、樣品量少(幾微克-幾毫克),特征性強(qiáng)(各種物質(zhì)有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。
(4)熒光分光光度計(jì)
熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、高壓壓力泵環(huán)保以及臨床檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域。
通過(guò)對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定,
不但可以做一般的定光度計(jì)量分析,
而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
(5)原子吸收分光光度計(jì)
該法主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器之一。是材料分析及質(zhì)量控制部門進(jìn)行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。1.檢定物質(zhì)2.
與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照3.
比較最大吸收波長(zhǎng)吸收系數(shù)的一致性4
純度檢驗(yàn)
5.
推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)6.絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定
分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸
收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,
相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子
、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其
特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或
測(cè)
定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
紫外可見(jiàn)分光光度法的定量分析基礎(chǔ)是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。朗伯定律是說(shuō)明光的吸收與吸收層厚度成正比,比耳定律說(shuō)明光的吸收高精度COD多參數(shù)分析測(cè)定儀與溶液濃度成正比;如果同時(shí)考慮吸收層厚度和溶液濃度對(duì)光吸收率的影響,即得朗伯-比耳定律。1.檢定物質(zhì)2.與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照3.比較最大吸收波長(zhǎng)吸收系數(shù)的一致性4純度檢驗(yàn)5.推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)6.絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。紫外可見(jiàn)分光光度法的定量分析基礎(chǔ)是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。朗伯定律是說(shuō)明光的吸收與吸收層厚度成正比,比耳定律說(shuō)明光的吸收與溶液濃度成正比;如果同時(shí)考慮吸收層厚度和溶液濃度對(duì)光吸收率的影響,即得朗伯-比耳定律。

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