分光光度計在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域主要應(yīng)用于：核酸的定量、蛋白質(zhì)的直接定量（UV法）、比色法蛋白質(zhì)定量。

1、核酸的定量

核酸的定量是分光光度計使用頻率最高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波長260 nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一，因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸，事先要選擇對應(yīng)的系數(shù)。如

2、蛋白質(zhì)的直接定量（UV法）

這種方法是在280nm波長，直接測試蛋白。選擇Warburg 公式，光度計可以直接顯示出樣品的濃度，或者是選擇相應(yīng)的換算方法，將吸光值轉(zhuǎn)換為樣品濃度。蛋白質(zhì)測定過程非常簡單，先測試空白液，然后直接測試蛋白質(zhì)。

3、比色法蛋白質(zhì)定量

蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的混合物，比色法測定的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分：氨基酸（如酪氨酸，絲氨酸）與外加的顯色基團(tuán)或者染料反應(yīng)，產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān)，從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度。

擴(kuò)展資料

分光光度計測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200～380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。

鎢燈的發(fā)射光譜：鎢燈光源所發(fā)出的380～780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后，可得到由紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫組成的連續(xù)色譜；該色譜可作為可見光分光光度計的光源。

參考資料來源：百度百科——分光光度計

上海君曦為你解答：
1. 測定溶液中物質(zhì)的含量
可見或紫外分光光度法都可用于測定溶液中物質(zhì)的含量。測定標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度已知的溶液)和未知液(濃度待測定的溶液)的吸光度，進(jìn)行比較，由于所用吸收池的厚度是一樣的。也可以先測出不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在選定的濃度范圍內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)該是一條直線，然后測定出未知液的吸光度，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到其相對應(yīng)的光度計濃度。含量 測定時所用波長通常要選擇被測物質(zhì)的最大吸收波長，這樣做有兩個好處：(1)靈敏度大，物質(zhì)在含量上的稍許變化將引起較大的吸光度差異；(2)可以避免其他物質(zhì)的干擾。
2．用紫外光譜鑒定化合物
使用分光光度計可以繪制吸收光譜曲線。方法是用各種波長不同的單色光分別通過某一濃度的溶液，測定此溶液對每一種單色光的吸光度，然后以波長為橫座標(biāo)，以吸光度為縱座標(biāo)繪制吸光度一波長曲線，此曲線即吸收光譜曲線。各種物質(zhì)有它自己一定的吸收光譜曲線，因此用吸收光譜曲線圖可以進(jìn)行物質(zhì)種類的鑒定。一定物質(zhì)在不同濃度時，其吸收光譜曲線 中，峰值的大小不同，但形狀相似，即吸收高峰和低峰的波長是一定不變的。紫外線吸收是由不飽和的結(jié)構(gòu)造成的，含有雙鍵的化合物表現(xiàn)出吸收峰。紫外吸收光譜比較簡單，同一種物質(zhì)的紫外吸收光譜應(yīng)完全一致，但具有相同吸收光譜的化合物其結(jié)構(gòu)不一定相同。除了特殊情況外，單獨(dú)依靠紫外吸收光譜決定一個未知物結(jié)構(gòu)，必須與其他方法配合。紫外吸收光譜分析主要用于已知物質(zhì)的定量分析和純度分析。
3.比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性 由于紫外吸收光譜只含有2～3個較寬的吸收帶，而紫外光譜主要是分子內(nèi)的發(fā)色團(tuán)在紫外區(qū)產(chǎn)生的吸收，與分子和其它部分關(guān)系不大。具有相同發(fā)色團(tuán)的不同分子結(jié)構(gòu)，在較大分子中不影響發(fā)色團(tuán)的紫外吸收光譜，不同的分子結(jié)構(gòu)有可能有相同的紫外吸收光譜，但它們的吸收系數(shù)是有差別的。如果分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸收波長相同，吸收系數(shù)也相同，則可認(rèn) 為分析樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品為同一物質(zhì)。
4．反應(yīng)動力學(xué)研究
借助于分光光度法可以得出一些化學(xué)反應(yīng)速度常數(shù)，并從兩個或兩個以上溫度條件下得到的速度數(shù)據(jù)，得出反應(yīng)活化能。
5.純度檢驗
紫外吸收光譜能測定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質(zhì)。如果化合物的紫外可見光區(qū)沒有明顯的吸收峰，而它的雜質(zhì)在紫外區(qū)內(nèi)有較強(qiáng)的吸收峰，就可以檢測出化合物中的雜質(zhì)。
6.氫鍵強(qiáng)度的測定
不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑。
7.絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定 金屬離子常與有機(jī)物形成絡(luò)合物，多數(shù)絡(luò)合物在紫外可見區(qū)是有吸收的，我們可以利用分光光度法來研究其組成。上海君曦為你解答：1. 測定溶液中物質(zhì)的含量 可見或紫外分光光度法都可用于測定溶液中物質(zhì)的含量。測定標(biāo)準(zhǔn)溶液(濃度已知的溶液)和未知液(濃度待測定的溶液)的吸光度，進(jìn)行比較，由于所用吸收池的厚度是一樣的。也可以先測出不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在選定的濃度范圍內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)該是一條直線，然后測定出未知液的吸光度，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到其相對應(yīng)的濃度。含量 測定時所用波長通常要選擇被測物質(zhì)的最大吸收波長，這樣做有兩個好處：(1)靈敏度大，物質(zhì)在含量上的稍許變化將引起較大的吸光度差異；(2)可以避免其他物質(zhì)的干擾。 2．用紫外光譜鑒定化合物 使用分光光度計可以繪制吸收光譜曲線。方法是用各種波長不同的單色光分別通過某一濃度的溶液，測定此溶液對每一種單色光的吸光度，然后以波長為橫座標(biāo)，以吸光度為縱座標(biāo)繪制吸光度一波長曲線，此曲線即吸收光譜曲線。各種物質(zhì)有它自己一定的吸收光譜曲線，因此用吸收光譜曲線圖可以進(jìn)行物質(zhì)種類的鑒定。一定物質(zhì)在不同濃度時，其吸收光譜曲線 中，峰值的大小不同，但形狀相似，即吸收高峰和低峰的波長是一定不變的。紫外線吸收是由不飽和的結(jié)構(gòu)造成的，含有雙鍵的化合物表現(xiàn)出吸收峰。紫外吸收光譜比較簡單，同一種物質(zhì)的紫外吸收光譜應(yīng)完全一致，但具有相同吸收光譜的化合物其結(jié)構(gòu)不一定相同。除了特殊情況外，單獨(dú)依靠紫外吸收光譜決定一個未知物結(jié)構(gòu)，必須與其他方法配合。紫外吸收光譜分析主要用于已知物質(zhì)的定量分析和純度分析。 3.比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性 由于紫外吸收光譜只含有2～3個較寬的吸收帶，而紫外光譜主要是分子內(nèi)的發(fā)色團(tuán)在紫外區(qū)產(chǎn)生的吸收，與分子和其它部分關(guān)系不大。具有相同發(fā)色團(tuán)的不同分子結(jié)構(gòu)，在較大分子中不影響發(fā)色團(tuán)的紫外吸收光譜，不同的分子結(jié)構(gòu)有可能有相同的紫外吸收光譜，但它們的吸收系數(shù)是有差別的。如果分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸收波長相同，吸收系數(shù)也相同，則可認(rèn) 為分析樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品為同一物質(zhì)。 4．反應(yīng)動力學(xué)研究 借助于分光光度法可以得出一些化學(xué)反應(yīng)速度常數(shù)，并從兩個或兩個以上溫度條件下得到的速度數(shù)據(jù)，得出反應(yīng)活化能。 5.純度檢驗 紫外吸收光譜能測定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質(zhì)。如果化合物的紫外可見光區(qū)沒有明顯的吸收峰，而它的雜質(zhì)在紫外區(qū)內(nèi)有較強(qiáng)的吸收峰，就可以檢測出化合物中的雜質(zhì)。 6.氫鍵強(qiáng)度的測定 不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵多參數(shù)水質(zhì)檢測儀強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑。 7.絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定 金屬離子常與有機(jī)物形成絡(luò)合物，多數(shù)絡(luò)合物在紫外可見區(qū)是有吸收的，我們可以利用分光光度法來研究其組成。